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猴降鈣素原(PCT)elisa試劑盒使用說明書
更新時間:2023-08-08瀏覽:695次

  猴降鈣素原(PCT)elisa試劑盒使用說明書


  本試劑盒僅供研究使用。

  檢測范圍: 96T

  8ng/L -450 ng/L

  使用目的:

  本試劑盒用于測定猴血清、血漿及相關液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。

  實驗原理

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴降鈣素原(PCT)水平。用純化的猴降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素原(PCT),再與HRP標記的降鈣素原(PCT)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素原(PCT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴降鈣素原(PCT)濃度。

  試劑盒操作步驟

  1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

  2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

  4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

  6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

  7. 溫育:操作同3。

  8. 洗滌:操作同5。

  9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

  10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

  11. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

  試劑盒注意事項

  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

  3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

  4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  保存條件及有效期

  1.試劑盒保存:;2-8℃。

  2.有效期:6個月

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