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小鼠單抗 Ig 類/亞類鑒定用 ELISA 試劑盒使用說明書
更新時間:2022-12-30瀏覽:1107次

  小鼠單抗 Ig 類/亞類鑒定用 ELISA 試劑盒使用說明書 天津本生

  試劑原理:本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克降抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類(可區(qū)分出IgG1\IgG2aIgG2bIgG3IgMgA)采用小鼠抗體共有位點的二抗包被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應(yīng),最后用 TMB 底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過酶標(biāo)儀檢測吸光度來判斷被測單克降抗體的類或亞類。本試劑盒具的分辨率,是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。

  二、組成成分:

  酶標(biāo)板含自封袋2個2x96 孔

  標(biāo)本稀釋液15m1通用陽性對照1.8ml

  顯色劑A15m1

  通用陰性對照1.8ml

  顯色劑 B15m1

  酶標(biāo)二抗6種

  6x4m1反應(yīng)終止液

  15m120x清洗液

  50mL加樣圖2份

  封板膜4 張說明書1份

  三、使用范圍:用于培養(yǎng)上清中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。

  四、使用方法:

  1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫(大約 30分),然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加 19 份純水 )。

  2、取出酶標(biāo)板。每個標(biāo)本需要6孔,陽性對照6孔,陰性對照6孔。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。

  3、將標(biāo)本檢測孔每孔先加入標(biāo)本稀釋液各 5041。然后將5041細(xì)胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)再加入酶標(biāo)微孔板,每個標(biāo)本加6孔;陽性對照和明性對照孔不加標(biāo)本稀釋液也是各加 6孔每孔 10041。貼上封板膜 37℃溫育30分鐘。

  4、棄去板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。再在每個標(biāo)本的6孔中分別加入6種酶標(biāo)二抗各 100%1,通用陽性、陰性對照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜 37℃溫育30分鐘。

  5、吸棄板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各 5041,換一張新的封板膜貼板避光 37℃顯色 20分鐘。

  6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果,看顯色藍的那個孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液(每孔5041)終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450mm測定波長,630mm參考波長雙波長測定結(jié)果,參看高值孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的 Ig類或亞類(陽性對照0D一般不小于 0.8,陰性對照一般不高于0.15,陽性判定標(biāo)準(zhǔn):樣品 OD 大于陰性0D10.15,陰性0D低于0.05按0.05算)。

  五、產(chǎn)品特點:高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。

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